Elisa试剂盒操作过程中注意事项有哪些?
接触Elisa实验多年,Elisa试剂盒操作过程复杂,从样本收集,实验操作,加样,洗涤,孵化都有很多注意事项,稍有不慎,将导致实验失败,本章MK体育(官方)网站 将就elisa试剂盒操作过程中的问题,与大家一起探讨。
⑴严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30~60min。
⑵加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
(3)封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致“花板”的出现。
(4)用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干:还要防止针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。
(5)合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
(6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
(7)显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
(8)加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。
(9)应保证C清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。
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