A549细胞的培养
点击次数：1711 更新时间：2016-04-29
A549细胞的培养
A549细胞为人肺腺癌细胞，属于传代细胞系，可稳定地传代培养。一般用胰酶消化后，加入生长液稀释，以1：2～1：3传代培养都是可行的。
一、[所需溶液]
1，细胞冲洗液：磷酸盐缓冲液(PBS)——无Ca、Mg
NACL8.00g；
KCL0.20g;
KH2PO40.20g;
Na2HPO4.。12H2O1.15g
加水至1000mL,将PH调至7.4，高压灭菌。
2，消化液
（1）胰酶-PBS
结晶胰酶2.5g;
高压灭菌后的PBS1000ml
用磁力搅拌器搅拌均匀，使其*溶解，通过0.22μm的滤膜过滤除菌，分装备用，放置—20℃保存。
（2）胰酶—EDTA:
结晶胰酶0.5g;
EDTA盐溶液0.2g
无Ca、MgPBS1000ml
用磁力搅拌器搅拌均匀，使其*溶解，通过0.22μm的滤膜过滤除菌，分装备用，放置—20℃保存。
1，细胞培养液：RPMI1640培养液
配制方法：
（1）将一袋干粉型RPMI1640培养基溶于900ml三蒸水中，冲洗包装袋两至三次倒入培养液中。
（2）加入丙酮酸钠0.1g，NaHCO22g以及双抗，加入磁力搅棒并置于磁力搅拌器上充分搅拌。双抗的配置浓度为100U/ML青霉素和100U/ML链霉素。(一般市售的青霉素为80万U/瓶，将其溶解于4ml三蒸水中，每升培养液中加入0.5ml；市售的链霉素为100万U/瓶，将其溶解于5ml三蒸水中，每升培养
