MK体育(中国)官方网站 的准确操作步骤
面对市场上种类越来越多的MK体育(中国)官方网站 ,人elisa试剂盒、小鼠elisa试剂盒、猪elisa试剂盒、羊elisa试剂盒等,再选择的时候我们就有些眼花缭乱了。虽然每个ELISA试剂盒价格都不贵,但是如果使用不恰当的话,造成检测结果出差错还是不好的。所以在使用MK体育(中国)官方网站 做检测的时候,步骤的准确性真的是相当重要的。以下先介绍一种简单的—间接法:
1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃;
2.次日洗涤3次;
3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;
4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分钟,洗涤;
6.zui后一遍用DDW洗涤。
7.加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
8.终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
9.结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+"、“-"号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
如果按照以上的步骤用于MK体育(中国)官方网站 检测的话,那么不论购买的国产ELISA试剂盒还是进口ELISA试剂盒的话,那么检测结果的准确率都不低的。