小鼠Elisa试剂盒使用指南：从样本处理到结果解读的全程指导
点击次数：248 更新时间：2024-10-15
小鼠ELISA试剂盒是生物医学研究中常用的工具，用于定量检测小鼠血清、血浆、细胞裂解液等样本中的特定目标蛋白。为了确保实验结果的准确性和可靠性，从样本处理到结果解读的每一步都需要严格遵循操作指南。
一、样本处理
样本处理是ELISA实验的第一步，也是至关重要的一步。不同类型的样本需要不同的预处理方法。
血清：将采集的血液样本在室温下放置2小时或4℃过夜，使其自然凝固。然后，以1000×g离心20分钟，收集上清液（血清）。建议在-20℃或-80℃下保存，避免反复冻融。
血浆：使用含抗凝剂的采血管采集血液样本，采集后30分钟内，4℃下以1000×g离心15分钟，收集上清液（血浆）。同样，建议在-20℃或-80℃下保存。
细胞裂解液：细胞裂解液需要经过裂解处理，以释放细胞内的蛋白质。这通常涉及反复冻融或使用超声波细胞破碎器。裂解后，以高速离心去除细胞碎片，收集上清液。
二、实验准备与操作
在实验开始前，确保所有试剂和样本都已平衡至室温。按照试剂盒说明书准备标准品、样本稀释液、检测抗体等。
加样：在酶标包被板上设置标准品孔和样本孔，加入不同浓度的标准品和待测样本。
加酶：每孔加入酶标试剂，然后封板并置于37℃温育一段时间。
洗涤：温育后，小心揭掉封板膜，弃去液体，用洗涤液洗涤多次，确保充分去除残留的液体。
显色：加入显色剂A和B，轻轻震荡混匀，37℃避光显色一段时间。
终止：加入终止液，终止反应。
三、结果解读
使用酶标仪在450nm波长处读取各孔的吸光度值。根据标准曲线计算样品中目标蛋白的浓度。标准曲线是通过将标准品浓度与相应的吸光度值进行关联而绘制的。
四、注意事项
严格按照试剂盒说明书操作，避免交叉污染。
洗涤步骤要che底，确保充分去除残留的液体。
避光保存试剂盒和底物溶液，避免光照影响试剂活性。
实验结束后，及时清理实验台面和器材，并进行消毒。
通过以上步骤，您可以成功使用小鼠ELISA试剂盒进行目标蛋白的定量检测。希望这份全程指导对您有所帮助！
