影响人ELISA试剂盒标本试验结果的因素
点击次数：1182 更新时间：2015-09-02
血清是zui常用的人ELISA试剂盒标本，血浆一般可视为与血清同等的标本，标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致，分为内源性物质和外源性物质两种,本文主要为大家介绍内源性物质：
内源性物质： 有人认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质，可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig (s)抗体、交叉反应物质和其它物质等。
1、类风湿因子
人血清中IgM、IgG型类风湿因子（RF）可以与人ELISA试剂盒系统中的捕获抗体及酶标记二抗的FC段直接结合，从而导致假阳性。
解决该情况的办法是：
1）用F(ab)2替代完整的IgG；
2）标本用联有热变性（63℃，10 min）IgG的固相吸附剂处理（将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有效）；③检测抗原时，可以用2-巯基乙醇等加入到标本稀释液中，使RF降解。
2、补体 ELISA系统中固相一抗和标记二抗过程中，人ELISA试剂盒抗体分子发生变构，其FC段的补体C1q分子结合位点被暴露出来，使C1q 可以将二者连接起来，人ELISA试剂盒从而造成假阳性。解决的办法是：①用EDTA稀释标本；②用53℃，10 min或56℃，30 min加热血清使C1q灭活。
3、嗜异性抗体 人类血清中含有能与啮齿类动物（如鼠等）Ig (s) 结合的天然嗜异性抗体，可将ELISA系统中一抗和二抗连接起来，也能造成假阳性。解决的办法是：可在标本稀释液中加入过量的动物Ig (s) ，但加入量不足或亚类不同时无效。
4、嗜靶抗原的自身抗体 抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体，有时能与靶抗原结合形成复合物，在人ELISA试剂盒方法中均可干扰抗原抗体测定结果。为避免以上情况出现，测定前需用理化方法将其解离后再测定。
